摘要:目的明确疏风解*胶囊发挥疏风解表作用的潜在物质基础。方法利用LC-MS建立疏风解*胶囊22个不同药材配比样品的MS谱库;采用与疏风解表相关的M3型乙酰胆碱受体高表达的中国仓鼠卵巢癌细胞CHO-K1/M3为体外药效筛选模型,检测22个样品对M3受体的激动活性;以22个样品特征峰的相对峰面积为自变量,以对M3受体的激动率为因变量,采用BP-神经网络算法进行谱-效关联分析。结果通过建立的最佳神经网络模型,计算得到16个特征峰与疏风解*胶囊对M3受体的激动活性显著相关。结论通过谱效研究,推测疏风解*胶囊发挥疏风解表的药效物质基础可能为包括二氢败酱苷、大*素、大*酸、连翘苷、连翘酯苷E、柴胡皂苷d、虎杖苷、毛蕊花糖苷等在内的16个化合物,为其质量标志物的确定提供了依据。
疏风解*胶囊是由虎杖、连翘、板蓝根、柴胡、败酱草、马鞭草、芦根、甘草8味中药组成的复方制剂,具有疏风解表、清热解*之功,一系列临床研究表明疏风解*胶囊对于治疗急性上呼吸道感染有良好的疗效[1-6]。目前,对疏风解*胶囊的研究多见于其临床应用、多指标含量测定及指纹图谱等质量控制研究[7-12],而对其药效物质基础研究少见报道,并且目前尚未见疏风解*胶囊谱效关系的研究报道。谱效关系研究是将指纹图谱与药效数据用特定的方式形成关系,通过研究它们之间的相关性,来阐明指纹图谱所表征的化学成分与药效的相互关系,确定药效物质基础,为质量标志物的确立提供了依据,使得用于中药质量控制的指纹图谱特征峰更具有针对性,更能反映中药与其药效基本一致的内在质量[13]。因此,本研究基于谱效关系,建立了疏风解*胶囊的化学成分与疏风解表药效的关联关系,以阐释其药效物质基础。
1材料
1.1仪器
AcquityUPLC超高效液相色谱仪、Premier质谱仪(美国Waters公司);AB-N电子天平(德国Mettler公司);高通量实时荧光检测分析系统FLIPR(MolecularDevices公司);MCO-5MCO2细胞培养箱(日本Olympus公司);超净工作台(苏州净化设备有限公司);倒置显微镜(日本Olympus公司);Milli-Q超纯水仪(美国Millipore公司);离心机(德国Hettich公司);超声仪(宁波新芝生物科技公司)。
1.2药材
虎杖、连翘、板蓝根、马鞭草、败酱草、柴胡、芦根、甘草药材均由安徽济人药业有限公司提供,经天津药物研究院张铁*研究员鉴定,虎杖为蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.的干燥根茎和根、连翘为木犀科植物连翘Forsythiasuspense(Thunb.)Vahl的干燥果实、板蓝根为十字花科菘蓝IsatisindigoticaFort.的干燥根、马鞭草为马鞭草科植物马鞭草VerbenaofficinalisL.的地上部位、败酱草为败酱科植物*花败酱PatriniaScabiossefoliaFisch.的干燥根茎、柴胡为伞形科植物柴胡BulperumchineseDC.的干燥根、芦根为禾本科植物芦苇Phragmites