图文来源于作者团队，欢迎各科研团队投稿。
长春大学食品功能性碳水化合物方向课题组酶法降解对黑木耳多糖抗氧化活性的影响
InternationalJournalofBiologicalMacromolecules
黑木耳是一种在药物和食品中具有双重功能的真菌。黑木耳多糖具有许多生理功能，包括抗肿瘤，抗衰老，降血糖和免疫调节。但是，由于黑木耳多糖的分子量高，因此很难研究黑木耳多糖的理化性质和生物学功能。由于其水溶性差，黑木耳多糖必须溶解在热水中，但黑木耳的多糖溶液具有较高的粘度，不利于跨细胞膜引起生物活性，使多糖的有效性降低。本研究旨在优化关键加工变量（酶剂量，酶解温度和酶解pH）对所需反应（还原糖生成量和DPPH自由基清除率）的酶解条件。利用紫外光谱（UV），高效凝胶色谱（HPGPC），高效液相色谱（HPLC），傅立叶红外光谱（FT-IR）和核磁共振（NMR）光谱分析降解的AAP。通过测量对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除活性，研究了降解的AAP的抗氧化活性。为黑木耳多糖的基础研究提供了可参考的理论基础。
英文文章题目：EnzymatichydrolysisofpolysaccharidefromAuriculariaauriculaandcharacterizationofthedegradationproduct
（点击左下角阅读原文，直达文献页面）。
成果介绍
研究方法
研究人员采用纤维素酶降解黑木耳多糖，以还原糖生成量和DPPH自由基清除率为指标，通过响应面试验优化酶解工艺，得到最佳酶解条件，并通过AB-8大孔树脂和SephadexG-25葡聚糖凝胶对黑木耳多糖降解产物进行纯化，采用紫外光谱（UV）、高效凝胶色谱（HPGPC）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（FT-IR）、核磁共振（NMR）光谱对黑木耳多糖降解产物进行分析。
研究结果
最佳酶解条件为：纤维素酶加酶量U/g、酶解温度50℃、酶解pH值4.2，在此条件下，还原糖生成量为16.50mg/mL，DPPH自由基清除率为87.97%。
通过AB-8大孔树脂和SephadexG-25葡聚糖凝胶对黑木耳多糖降解产物进行纯化，发现该多糖为均一多糖；紫外光谱显示该多糖可能含有少量结合的糖蛋白；采用高效凝胶色谱（HPGPC）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（FT-IR）、核磁共振（NMR）光谱对黑木耳多糖酶解产物进行分析，结果表明降解后多糖分子量变小，但多糖的主要结构并未发生改变，主要由甘露糖（57.1%）、葡萄糖醛酸（10.0%）、鼠李糖（0.4%）、葡糖糖（22.5%）、半乳糖（2.9%）、木糖（6.0%）和岩藻糖（1.1%）构成。
抗氧化活性研究结果显示，酶解多糖对羟自由基和超氧阴离子自由基的IC50分别为1.mg/mL、2.mg/mL，黑木耳原多糖对羟自由基和超氧阴离子自由基的IC50分别为3.、4.mg/mL，表明黑木耳多糖及其酶解多糖具有较好的抗氧化能力，并且酶解可以提高多糖的抗氧化能力。
研究结论
本研究利用酶法降解黑木耳多糖，并应用响应面试验优化酶解条件，得到了还原糖生成量以及DPPH自由基清除率最佳的工艺条件。对酶解后的黑木耳多糖进行纯化处理，并运用紫外光谱（UV）、高效凝胶色谱（HPGPC）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（FT-IR）、核磁共振（NMR）光谱对黑木耳多糖降解产物进行分析，发现降解后的多糖的分子量减小，且结构未发生变化，组分为均一多糖，抗氧化活性得到了提升，为黑木耳多糖的相关研究提供了理论依据。
论文受资助情况：长春大学科研培育项目（ZKQ）.
创新性/应用前景
本研究采用纤维素酶对黑木耳多糖进行降解，并对其酶解工艺条件进行了优化。与黑木耳多糖相比，黑木耳酶解多糖分子量降低、抗氧化活性显著增高。在活性研究方面，可以对黑木耳酶解多糖进行体内抗氧化活性研究或其他功能活性的探索，可作为抗氧化活性物质进行应用，为黑木耳多糖的开发提供充分的实验依据。
参考文献
