大家好！今天分享的文章是“PurifificationandCharacterizationofTwoDifferenta-L-Rhamnosidases,RhaAandRhaB,fromAspergillusaculeatus”。该文在年5月发表于appliedandenvironmentalmicrobiology,作者是PalomaManzanares等人。
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引言
分泌糖苷酶的微生物遍布整个自然界，并且在多糖的水解和分解代谢中起重要作用；对曲霉菌和木霉菌已经进行了详细的研究；曲霉属的丝状真菌由于其产生代谢产物（如有机酸和胞外糖苷酶）的能力而对食品工业很重要。黑曲霉是产生糖苷酶活性的重要来源，能够相对大量地产生多种酶活性。
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成果
真菌来源的α-L-鼠李糖苷酶已从青霉菌和曲霉菌的商业酶制剂中纯化得到。最近，已经有研究表明米曲霉和构巢曲霉来源的α-L-鼠李糖苷酶，具有潜在的酿酒学意义。棘孢曲霉是果胶降解酶如鼠李糖半乳糖醛酸水解酶和鼠李糖半乳糖醛酸乙酰酯酶的良好生产者。本文描述了从棘孢曲霉果胶分解酶制剂中纯化α-L-鼠李糖苷酶。作者使用棘孢曲霉作为生产α-L-鼠李糖苷酶的来源，并且报告了两种不同的显示α-L-鼠李糖苷酶活性的酶的生化特性。利用多克隆抗体，作者从橙皮苷诱导的cDNA文库中克隆了两个α-L-鼠李糖苷酶的相应cDNA。
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图文解读
图1：类*酮橙皮苷结构[3’,5,7-三羟基-4’-甲氧基*酮-7-α-L-鼠李吡喃糖苷-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖苷],槲皮素[3,3’,4’,5,7-五羟基*酮-3-α-L-鼠李吡喃糖苷],芦丁[3,3’,4’,5,7-五羟基*酮-3-α-L-鼠李吡喃糖苷-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖苷],柚皮苷[4’,5,7-三羟基-*烷酮-7-α-L-鼠李吡喃糖苷-(1,2)-β-D-吡喃葡萄糖苷]；箭头表示可能被鼠李糖苷酶水解的连接键。
表1：来源棘孢曲霉鼠李糖苷酶AB的纯化
表2：鼠李糖苷酶A、B的底物特异性
a、底物浓度：4.1mM（橙皮苷和芦丁），4.3mM（柚皮苷），和5.6mM（槲皮苷）。
b、在30°C下14小时内鼠李糖总释放量。最终蛋白质浓度为1.1mg/ml（RhaA）和1.5mg/ml（RhaB）。ND，不确定。
图2：使用ClustalW和Boxshade(
